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产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® LDH乳酸脱氢酶漏出率检测试剂盒是利用LDH催化乳酸生成丙酮酸和NADH，NADH通过电子载体将显色剂还原生成橙黄色物质，在450 nm处的OD值与LDH成正比，利用此原理可以测定死细胞和受损细胞的LDH漏出情况。
LDH（乳酸脱氢酶）是存在于细胞质的一种酶，当细胞膜受到损伤时，LDH 会释放到培养基中。由于释放出的LDH 稳定，检测培养基中LDH 的量可以作为测定死细胞和受损细胞数量的指标。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞、组织染色，免疫组织化学，细胞培养等相关试剂盒产品。
保存温度
2-8℃
注意事项
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
有效期
一年
检测方法
1. 酶标仪
2. 分光光度计
2. 分光光度计
适用样本
1. 悬浮细胞
2. 贴壁细胞
2. 贴壁细胞
仪器准备
1. 酶标仪/分光光度计
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
冰盒
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
冰盒
试剂准备
1. PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 96孔板
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 96孔板
使用注意事项
1. LDH反应液短期存放于2-8℃，长期存放请分装后-20℃避光保存。
2. 避免反复冻融。
3. 冻存后溶解时注意重新混匀。
2. 避免反复冻融。
3. 冻存后溶解时注意重新混匀。
使用方法
试剂配制：
将LDH抽提液A与无血清培养基按1：9比例混合（例如：1ml试剂A加入9 ml不含血清的培养基），充分混匀，即成LDH抽提液工作液。
LDH抽提：
1. 将所需检测的细胞样品孔中的培养基吸入一块新的96孔培养板II。
2. 在留下细胞的原培养板I中加入100 μl LDH抽提液工作液。
3. 将加入了LDH抽提液工作液的培养板I室温轻轻振荡30-45分钟。
LDH测定：
1. 在培养板I和培养板II的对应孔每孔加入10 μl LDH反应液，充分混匀。
2. 在37℃避光孵育45-240分钟。
3. 在450 nm测定吸光值。分别测定培养板I的ODI、培养板II的ODII、空白对照孔的OD空白值。
LDH漏出率计算：
LDH漏出率=（ODII）÷（ODII +ODI）×100%
将LDH抽提液A与无血清培养基按1：9比例混合（例如：1ml试剂A加入9 ml不含血清的培养基），充分混匀，即成LDH抽提液工作液。
LDH抽提：
1. 将所需检测的细胞样品孔中的培养基吸入一块新的96孔培养板II。
2. 在留下细胞的原培养板I中加入100 μl LDH抽提液工作液。
3. 将加入了LDH抽提液工作液的培养板I室温轻轻振荡30-45分钟。
LDH测定：
1. 在培养板I和培养板II的对应孔每孔加入10 μl LDH反应液，充分混匀。
2. 在37℃避光孵育45-240分钟。
3. 在450 nm测定吸光值。分别测定培养板I的ODI、培养板II的ODII、空白对照孔的OD空白值。
LDH漏出率计算：
LDH漏出率=（ODII）÷（ODII +ODI）×100%
参考文献
1. Gang Wang et al.
Quercetin-loaded freeze-dried nanomicelles: Improving absorption and anti-glioma efficiency in vitro and in vivo
Journal of Controlled Release 2016 （IF=11.467）
2. Gang Wang et al.
In vitro and in vivo evaluation of functionalized chitosan–Pluronic micelles loaded with myricetin on glioblastoma cancer
Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine 2016 （IF=6.5）
Quercetin-loaded freeze-dried nanomicelles: Improving absorption and anti-glioma efficiency in vitro and in vivo
Journal of Controlled Release 2016 （IF=11.467）
2. Gang Wang et al.
In vitro and in vivo evaluation of functionalized chitosan–Pluronic micelles loaded with myricetin on glioblastoma cancer
Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine 2016 （IF=6.5）
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