

产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® 微生物细胞内pH值检测试剂盒采用BBcellProbe® P11胞内pH值荧光探针检测微生物胞内pH值的变化。BBcellProbe® P11是pH敏感的荧光染料,其在碱性条件下荧光强更高,反之酸性条件下变低,从而BBcellProbe® P11可被用于监测微生物胞内pH变化,见图一。 BBcellProbe® P11是一种可以穿透细胞膜的荧光染料,产生的荧光物质最大激发波长为 488 nm,最大发射波长为 528 nm,其在不同的pH值条件下发射的荧光强度不同,从而可以
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
1.探针长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.探针A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
2.探针A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期
6个月
检测方法
荧光酶标仪或光度计或流式细胞仪
适用样本
细菌
产品应用
荧光酶标仪或光度计或流式细胞仪
仪器准备
1.荧光酶标仪或光度计或流式细胞仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 2.HBSS 3. Nigericin sodium salt(相关产品BB-94002)(备选,如果需要绘制标准曲线定量测定)
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套,4.荧光检测专用黑色96孔板
2.吸头
3.一次性手套,4.荧光检测专用黑色96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
2.pH探针为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.BBcellProbe® P11探针容易受潮,受潮后稳定性较差,注意干燥保存。
4.吸取BBcellProbe® P11探针母液时要用干燥的新吸头,不能使用含水的吸头。
5.未使用完的BBcellProbe® P11探针母液请拧紧螺旋盖,避免受潮失效。
6.BBcellProbe® P11探针工作液含水,配制后不可以长期保存,须现配现用。
7.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
2.pH探针为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.BBcellProbe® P11探针容易受潮,受潮后稳定性较差,注意干燥保存。
4.吸取BBcellProbe® P11探针母液时要用干燥的新吸头,不能使用含水的吸头。
5.未使用完的BBcellProbe® P11探针母液请拧紧螺旋盖,避免受潮失效。
6.BBcellProbe® P11探针工作液含水,配制后不可以长期保存,须现配现用。
7.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
使用方法
1. 染色工作液的配制:
根据样品数,用探针稀释液将P11探针进行10倍稀释, 然后再用HBSS缓冲液稀释 BBcellProbe® P11溶液20倍,配制成BBcellProbe® P11染色工作液。
2. 将 BBcellProbe® P11染色工作液加入已处理好的细胞,在37℃孵育60-120 分钟。
3. 用PBS洗涤细胞2-3次。用PBS重悬细胞。
4. 然后用该细胞进行荧光细胞内pH变化情况检测。
激发波长 488-506 nm,发射波长526-536 nm。
【注】:
荧光强度增加则细胞内pH值增加,荧光强度降低则细胞内pH值下降。
必须使用荧光检测专用黑色96孔板。
根据样品数,用探针稀释液将P11探针进行10倍稀释, 然后再用HBSS缓冲液稀释 BBcellProbe® P11溶液20倍,配制成BBcellProbe® P11染色工作液。
2. 将 BBcellProbe® P11染色工作液加入已处理好的细胞,在37℃孵育60-120 分钟。
3. 用PBS洗涤细胞2-3次。用PBS重悬细胞。
4. 然后用该细胞进行荧光细胞内pH变化情况检测。
激发波长 488-506 nm,发射波长526-536 nm。
【注】:
荧光强度增加则细胞内pH值增加,荧光强度降低则细胞内pH值下降。
必须使用荧光检测专用黑色96孔板。
参考文献
1. Xingyue Bao et al.
Ornithine decarboxylation (ODC) system of Shewanella baltica regulates putrescine production and acid resistance
J Food Prot 2020
2. Weitao Su et al.
Interaction between PHB2 and Enterovirus A71 VP1 Induces Autophagy and Affects EV-A71 Infection
Viruses 2020
3. Tie Zhu et al.
SNX11 Identified as an Essential Host Factor for SFTS Virus Infection by CRISPR Knockout Screening
Virologica Sinica 2019
Ornithine decarboxylation (ODC) system of Shewanella baltica regulates putrescine production and acid resistance
J Food Prot 2020
2. Weitao Su et al.
Interaction between PHB2 and Enterovirus A71 VP1 Induces Autophagy and Affects EV-A71 Infection
Viruses 2020
3. Tie Zhu et al.
SNX11 Identified as an Essential Host Factor for SFTS Virus Infection by CRISPR Knockout Screening
Virologica Sinica 2019
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