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产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® 黄嘌呤氧化酶（XOD）检测试剂盒是利用XOD 催化黄嘌呤产生尿酸，尿酸在 290nm 下有特征吸收峰，吸光值反映了黄嘌呤氧化酶含量。 黄嘌呤氧化酶（XOD）催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子，是活性氧主要来源之一；同时 也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD 主要分布于哺乳动物的心，肺，肝脏等组织中，当肝 功能受损时，XOD 大量释放到血清中，对肝损害的诊断具有特异性的意义。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞、组织染色，免疫组织化学，细胞培养等相关试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
3个月
检测方法
分光光度计
适用样本
血清、血浆、细胞、组织、细菌
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.离心机
3.研钵
4.水浴锅
5.移液器
2.离心机
3.研钵
4.水浴锅
5.移液器
试剂准备
1.纯水
2.冰
2.冰
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.1mL 玻璃比色皿
2.吸头
3.一次性手套
4.1mL 玻璃比色皿
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.正式测定前，请务必取2~3个预期差异较大的样本做下预实验。
2.正式测定前，请务必取2~3个预期差异较大的样本做下预实验。
使用方法
一、 样本处理
1、 细胞、组织或细菌样品的制备：
培养细胞或细菌：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量 （104个）：提取液A体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液A），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：
按照组织质量（g）：提取液A体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织， 加入 1mL 提取液A），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、 血清（浆）样品：直接检测。
二、 XOD 检测工作液的配制
用时在每瓶试剂C中加入 15mL 试剂B，充分混匀，现配现用；
三、 样本测定
1. 打开分光光度计，预热30min以上，调节检测波长至290nm，纯水调零；
2. 测定前将 XOD 检测工作液 37℃(哺乳动物)或 25℃（其它物种）水浴 10min。
3. 取 1mLXOD 检测工作液于 1mL 石英比色皿中，再加入 35μL 样本，混匀，室温下立即测定290nm 下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2，计算 ΔA＝A2-A1。
四、 计算公式
1、 血清（浆）XOD 计算：
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD（nmol/min/mL）
＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109 ]÷V 样÷T
=2424×ΔA
2、组织、细菌或细胞中 XOD 计算：
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD（nmol/min/mg prot）
＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109 ]÷(V 样×Cpr)÷T
=2424×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每 g 组织每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD（nmol/min/g 鲜重）
＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109 ]÷（W ×V 样÷V 样总）÷T
=2424×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每一万个细菌或细胞每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD（nmol/min/104 cell）
=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109 ]÷（500×V 样÷V 样总）÷T
=4.848×ΔA
V 反总：反应体系总体积，1.035×10-3 L；
ε：尿酸摩尔消光系数，1.22×104 L/ mol /cm；
d： 比色皿光径，1cm；
V 样：加入样本体积，0.05 mL；
V 样总：加入提取液体积，1 mL；
T： 反应时间，1 min；
W：样本质量，g；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
500：细胞或细菌总数，500 万。
1、 细胞、组织或细菌样品的制备：
培养细胞或细菌：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量 （104个）：提取液A体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液A），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：
按照组织质量（g）：提取液A体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织， 加入 1mL 提取液A），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、 血清（浆）样品：直接检测。
二、 XOD 检测工作液的配制
用时在每瓶试剂C中加入 15mL 试剂B，充分混匀，现配现用；
三、 样本测定
1. 打开分光光度计，预热30min以上，调节检测波长至290nm，纯水调零；
2. 测定前将 XOD 检测工作液 37℃(哺乳动物)或 25℃（其它物种）水浴 10min。
3. 取 1mLXOD 检测工作液于 1mL 石英比色皿中，再加入 35μL 样本，混匀，室温下立即测定290nm 下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2，计算 ΔA＝A2-A1。
四、 计算公式
1、 血清（浆）XOD 计算：
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD（nmol/min/mL）
＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109 ]÷V 样÷T
=2424×ΔA
2、组织、细菌或细胞中 XOD 计算：
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD（nmol/min/mg prot）
＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109 ]÷(V 样×Cpr)÷T
=2424×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每 g 组织每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD（nmol/min/g 鲜重）
＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109 ]÷（W ×V 样÷V 样总）÷T
=2424×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每一万个细菌或细胞每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD（nmol/min/104 cell）
=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109 ]÷（500×V 样÷V 样总）÷T
=4.848×ΔA
V 反总：反应体系总体积，1.035×10-3 L；
ε：尿酸摩尔消光系数，1.22×104 L/ mol /cm；
d： 比色皿光径，1cm；
V 样：加入样本体积，0.05 mL；
V 样总：加入提取液体积，1 mL；
T： 反应时间，1 min；
W：样本质量，g；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
500：细胞或细菌总数，500 万。
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