细胞铁检测试剂盒

BB-47511
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  • 100T
价格
  • ¥300元
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产品概述 product description

铁是人体必需微量元素,总含量约为3270mg,铁分布较广,有67.6%的铁作为血红蛋白分子的辅基分布于血红蛋白中,参与铁的运输;骨骼和肌红蛋白中各存在2.59%和4.15%,储存铁约占25.37%血清中铁均以三价铁离子形式与转铁蛋白结合,因此测定血清铁时,首先需要Fe3+与转铁蛋白分离。 贝博® BBcellProbe® 细胞铁检测试剂盒(亚铁嗪微板法)是采用分光光度法以亚铁嗪为底物进行铁的检测,在酸性介质中与转铁蛋白结合的血清铁从转铁蛋白中解离出来,其他样品中的铁在酸性介质环境下也会被解离,再被还原剂还原为Fe2+,后者与亚铁嗪生成紫红色化合物,通过酶标仪检测562 nm处吸光度,适用于检测细胞样品中的铁含量。 上述检测方法属于直接检测法,应设空白,纠正样本本身的色度,根据公式计算出铁含量,该检测试剂盒在140 μmol/L以下线性关系良好,甘油三脂≤3.39 mmol/L,胆红素≤171 μmol/L,对本法基本无干扰。 本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞、组织染色,免疫组织化学,细胞培养等相关试剂盒产品。

保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
1.96孔板
2.离心管
3.吸头
4.一次性手套
适用样本
细胞
产品应用
酶标仪
仪器准备
1.酶标仪
2.离心机
3.研钵
4.水浴锅
5.移液器
6.1mL 玻璃比色皿
试剂准备
1.纯水
2.PBS
3.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.如果样品浓度过高,应用双蒸水稀释后再检测,结果乘以稀释倍数;
3.实验过程中用到的水,不可用普通的蒸馏水,尽量采用纯水;
4.玻璃器材需要10%的盐酸浸泡24h,取出后用去离子水冲洗后才可以使用;
5.避免与铁器接触,防止铁污染;
6.标准品呈色24h稳定,随着时间的延长,颜色会慢慢加深,应在1h内检测完毕;
7.0.97位体积校正值。
使用方法

一、 样本处理
先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照1-10*106个细胞数量加入500 μl体积提取液F,匀浆器或超声破碎细胞(冰浴,功率 20%或 200 W,超声 3 s,间隔 10 s,重复 30次); 8000g 4℃离心 10 min,取上清,置冰上待测。

二、 铁标准工作液的配制
取适量的铁标准(100 μg/ml),按铁标准(100 μg/ml):铁标准稀释液=1:49的比例配制铁标准(2 μg/ml),即为铁标准工作液。2~8℃避光保存,3个月有效。

三、 铁的加样
选用经稀酸处理及去离子水清洁的96孔板,按照下表设置空白孔、标准孔、样品孔,溶液应按照顺序依次加入,并避免产生气泡。如果样品中铁离子含量过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置平行孔。
混匀,室温静置15 min或37℃孵育10 min。
以空白孔调零,酶标仪562 nm处检测标准孔、样品孔的吸光度,1 h内检测完毕。

四、 计算公式
铁(μmol/g)=([A样品-(A空白 x 0.97)] / A标准)x 35.8 / 待测样品的蛋白浓度(g/L)

【注】:
A样品:样品孔加入显色液后测定的吸光度;
A空白:样品孔未加入显色液前测定的吸光度;
A标准:标准孔的吸光度;
0.97: 体积校正值。

单位换算:铁标准(2 μg/ml)=铁标准(35.8 μmol/L)
μg/dl=μmol/L/0.179
μmol/L=0.179 x μg/dl=17.9 x μg/ml

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