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产品概述
product description
髓过氧化物酶中性粒细胞所特有，即使在有强吞噬作用的世噬细胞中也极少或完全没有这种酶作为中性粒细胞得到标志。其功能为将氯氧化物和氧化氢转变为次氯盐酸。在炎症状态下，它被释入细胞外液，进入循环。此酶参与含LDL的脂类氧化。 中性白细胞中存在有髓过氧气化物酶，每个细胞所含的酶的量是一定的，约占细胞干重的5%，该酶具有使过氧化氢还原的能力，利用这一特点可以分析酶的活力，并定量测定中性白细胞的数目。 贝博TM BBcellProbeTM 髓过氧化物酶检测原理如下： MPO+ H2O2 -------﹥复合物；复合物+AH2(供氢体) -------﹥H2O+MPO+A产物 通过供氢体邻连茴香胺供氢后生成黄色化合物，在460 nm处通过比色测定产物的生成量从而推算出MPO的活力及H2O2减少的量和白细胞的数目。 贝博TM BBcellProbeTM 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博TM BBcellProbeTM 可以为您提供各种颜色的BBcellProbeTM M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
血清、血浆、细胞裂解液、组织裂解液
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.离心机
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.恒温水浴锅
3.离心机
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
2.吸头
使用注意事项
1.试剂D天冷时会凝固，使用前可放入37℃以上的水浴中摇晃使其溶解至透明后方可使用；
使用方法
试剂配制
1. 试剂A缓冲工作液的配制：
按试剂 A贮备液：纯水=1：9配制，用多少配多少，配好后充分混合后待用，配制好的工作液，2-8℃可保存1个月。
2. 试剂B工作液配制：
使用前每支试剂B粉剂加配置好的试剂A缓冲工作液60ml溶解，可以37℃加热溶解；2-8℃可保存2周。
3. 试剂C工作液配制：
使用前将1支试剂C1粉剂倒入1支试剂C2溶剂中溶解；最好提前一天配制，充分溶解后2-8℃可保存2周。
4. 显色剂配制：
使用前将试剂E粉剂1支加入到100ml试剂A缓冲工作液中，充分摇匀；待粉剂完全溶解后再加入试剂F 0.1ml，充分混匀，即得显色剂；2-8℃避光保存；
组织样本的操作步骤：
(一)、样本前处理
1. 准确称取组织重量，以配好的试剂B工作液为匀浆介质，按重量：体积=1:19加匀浆介质制成5%的组织匀浆，不需要进行离心；
2. 取5%组织匀浆0.9ml加试剂C工作液0.1ml；充分混匀后37℃水浴15min，取出后待测；
（三）、计算公式：
1. MPO酶活力单位定义：
每克组织湿重在37℃的反应体系中每1umol H2O2被分解，为1个酶活力单位；
2. 计算公式：
MPO活力 = 测定OD值 – 对照OD值
（U/克组织湿重） 11.3 x 取样量（克）
【注】： 11.3 为斜率的倒数
取样量为取样中所含组织的湿重量（克）
血清（浆）样本检测：
(一)、样本前处理
1. 取血清（浆）与试剂B工作液按1:1稀释，充分混匀；
2. 取上面的混合液0.9ml加试剂C工作液 0.1ml，充分混匀后37℃水浴15min，取出后待测；
（三）、计算公式：
1. 酶活力单位定义：每升血清（浆）在37℃的反应体系中H2O2被分解1umol为1 个酶活力单位；
2. 计算公式：
MPO活力 = 测定OD值 – 对照OD值
（U/L） 11.3 x 取样量（升）
【注】： 11.3 为斜率的倒数
取样量为取样中所含血清的量（升）
3. 计算举例：
取0.45ml的血清加0.45ml的试剂B工作液充分混匀，再加0.1ml的试剂C工作液,再充分混匀，37℃水浴15分钟，取0.2ml做检测，测得测定管OD值0.053，对照管OD 值0.013，则计算结果如下：
MPO活力 = 0.053– 0.013 x 1000 = 39.33（U/L）
（U/升） 11.3 x 0.45/1 x 0.2
1. 试剂A缓冲工作液的配制：
按试剂 A贮备液：纯水=1：9配制，用多少配多少，配好后充分混合后待用，配制好的工作液，2-8℃可保存1个月。
2. 试剂B工作液配制：
使用前每支试剂B粉剂加配置好的试剂A缓冲工作液60ml溶解，可以37℃加热溶解；2-8℃可保存2周。
3. 试剂C工作液配制：
使用前将1支试剂C1粉剂倒入1支试剂C2溶剂中溶解；最好提前一天配制，充分溶解后2-8℃可保存2周。
4. 显色剂配制：
使用前将试剂E粉剂1支加入到100ml试剂A缓冲工作液中，充分摇匀；待粉剂完全溶解后再加入试剂F 0.1ml，充分混匀，即得显色剂；2-8℃避光保存；
组织样本的操作步骤：
(一)、样本前处理
1. 准确称取组织重量，以配好的试剂B工作液为匀浆介质，按重量：体积=1:19加匀浆介质制成5%的组织匀浆，不需要进行离心；
2. 取5%组织匀浆0.9ml加试剂C工作液0.1ml；充分混匀后37℃水浴15min，取出后待测；
（三）、计算公式：
1. MPO酶活力单位定义：
每克组织湿重在37℃的反应体系中每1umol H2O2被分解，为1个酶活力单位；
2. 计算公式：
MPO活力 = 测定OD值 – 对照OD值
（U/克组织湿重） 11.3 x 取样量（克）
【注】： 11.3 为斜率的倒数
取样量为取样中所含组织的湿重量（克）
血清（浆）样本检测：
(一)、样本前处理
1. 取血清（浆）与试剂B工作液按1:1稀释，充分混匀；
2. 取上面的混合液0.9ml加试剂C工作液 0.1ml，充分混匀后37℃水浴15min，取出后待测；
（三）、计算公式：
1. 酶活力单位定义：每升血清（浆）在37℃的反应体系中H2O2被分解1umol为1 个酶活力单位；
2. 计算公式：
MPO活力 = 测定OD值 – 对照OD值
（U/L） 11.3 x 取样量（升）
【注】： 11.3 为斜率的倒数
取样量为取样中所含血清的量（升）
3. 计算举例：
取0.45ml的血清加0.45ml的试剂B工作液充分混匀，再加0.1ml的试剂C工作液,再充分混匀，37℃水浴15分钟，取0.2ml做检测，测得测定管OD值0.053，对照管OD 值0.013，则计算结果如下：
MPO活力 = 0.053– 0.013 x 1000 = 39.33（U/L）
（U/升） 11.3 x 0.45/1 x 0.2
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