2-8℃ 避光

开盖后组份按要求条件保存。

3个月

分光光度计

分光光度计

1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.移液器
4.漩涡混匀器

1.冰乙酸
2.纯水

1.离心管
2.吸头

1.必须每一只管子单独做，并且反应时间精确控制在1min；
2.必须严格按照操作表顺序加入试剂，不可配置混合试剂；
3.检测样本溶剂或介质可为生理盐水、纯水，但不能为磷酸缓冲液、无水乙醇等；
4.此法检测灵敏度较高，检测血清（浆）和组织以外的样本时，最好先取原液及不同浓度稀释后的样本，例如5倍形式液或10倍稀释液做预试；如果样本管颜色太浅可将样本用其溶剂继续稀释至颜色较深为止。

试剂配制
1. 0.03%标准品工作液的配制：
按试剂 A储备液：纯水=1：99配制，用多少配多少；
2. 底物工作液配制：
（1）如果样本为抑制羟自由基，即样本管吸光度小于对照管吸光度，底物工作液的配制方法如下：
按试剂 B底物储备液：纯水=1：99配制，用多少配多少；
（2）如果样本为产生羟自由基，即样本管吸光度大于对照管吸光度，底物工作液的配制方法如下：
按试剂 B底物储备液：纯水=1：299配制，用多少配多少；
3. 试剂C1工作液配制：按试剂C1：纯水=1：9配制；
4. 试剂C工作液配制：按试剂C1工作液：试剂C2=1：1配制；用多少配多少；剩余的2-8℃；
5． 试剂D工作液的配制：
用时将试剂D加纯水稀释至100ml即可，2-8℃保存；若有结晶，则37℃水浴至完全溶解后在加纯水稀释；
6. 显色剂的配制：试剂D工作液：试剂E:试剂F：冰乙酸=8:3:3:2，用多少配多少。

注：1.抑制羟自由基的物质：血清（浆）、各种组织匀浆液等；
2.产生羟自由基的物质：中性白细胞、某些药物、部分植物等。

（三）、计算公式：
血清（浆）中抑制羟自由基能力的计算：
1. 定义：
每ml血清（浆）在37℃反应1min，使体系中H2O2浓度降低1mmol/L为
1个抑制羟自由基能力单位；

2. 计算公式：

抑制羟自由基能力 = （对照OD值-样本OD值）/（标准OD值-空白OD值）
（U/ml） X 标准品浓度（8.824mmol/L）X (1ml/取样量) X
样本测试前的稀释倍数
组织样本中抑制羟自由基能力的计算：
1. 定义：
每mg组织蛋白在37℃反应1min，使体系中H2O2浓度降低1mmol/L为
1个抑制羟自由基能力单位；

2. 计算公式：

抑制羟自由基能力 = （对照OD值-样本OD值）/（标准OD值-空白OD值）
（U/mgprot） X 标准品浓度（8.824mmol/L）÷{待测样本蛋白浓度（mgprot/ml）X 取样量（0.2ml）}

溶血液样本中抑制羟自由基能力的计算：
1. 定义：
每mg血红蛋白在37℃反应1min，使体系中H2O2浓度降低1mmol/L为
1个抑制羟自由基能力单位；

2. 计算公式：

抑制羟自由基能力 = （对照OD值-样本OD值）/（标准OD值-空白OD值）
（U/mgHb） X 标准品浓度（8.824mmol/L）X (1ml/取样量) X
样本测试前的稀释倍数÷血红蛋白浓度（mgHb/ml）


产生羟自由基能力的计算公式：
1. 定义：
每ml或每mg物质或每立方厘米内106个细胞在本反应体系中使体系中H2O2浓
度增加1mmol/L为1个产生羟自由基能力单位；

2. 计算公式：

产生羟自由基能力 = （样本OD值-对照OD值）/（标准OD值-空白OD值）
（U/ml） X 标准品浓度（8.824mmol/L）X (1ml/取样量) X
样本测试前的稀释倍数


【注】： 必须每一只管子单独做；
反应时间精确在1min。