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产品概述
product description
贝博TM cellProbeTM酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒检测原理是酸性磷酸酶(ACP)水解磷酸苯二钠，产生酚和无机磷，经碱处理后酚能与4-AAP反应，产物经氧化生成红色醌类化合物。红色越多，说明酸性磷酸酶活性越高，反之则酶活性越低，通过分光光度比色法测定510nm处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。 本试剂盒主要用于检测血清中前列腺酸性磷酸酶活性，也可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的酸性磷酸酯酶活性。 贝博TM BBcellProbeTM 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博TM BBcellProbeTM 可以为您提供各种颜色的BBcellProbeTM M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
血清血浆/组织/细胞
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.比色皿
6.冰盒
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.比色皿
6.冰盒
试剂准备
1.纯水
耗材准备
1.试管
2.吸头
3.离心管
2.吸头
3.离心管
使用注意事项
1.待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂，同时需避免反复冻融。
2.建议每次测定时都做标准曲线，以使标准更准确，另外标准品需避免反复冻融。
3.可以使用酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定。
4.所测样本的值高于标准曲线的上限，应用ACP检测液稀释样品后重新测定。
5.待测样品中酸性磷酸酶活性较低时，可适当延长孵育时间至30min。
2.建议每次测定时都做标准曲线，以使标准更准确，另外标准品需避免反复冻融。
3.可以使用酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定。
4.所测样本的值高于标准曲线的上限，应用ACP检测液稀释样品后重新测定。
5.待测样品中酸性磷酸酶活性较低时，可适当延长孵育时间至30min。
使用方法
一、准备样品：
1、 血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存，用于酸性磷酸酯酶的检测。
2、 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要可用PBS或生理盐水进行适当匀浆（一般细胞数量在106以上，组织应在100mg以上），低速3000-4000g离心取上清，-20℃冻存，用于酸性磷酸酯酶的检测。
3、 高活性样品：如果样品中含有较高活性的酸性磷酸酶，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，也可以采用试剂C：ACP 检测液稀释。
4、 植物样本：取适量的植物组织加入少量生理盐水或PBS，充分捣碎或研磨，静置30min，用纱布或滤纸过滤，4000g离心20min，取上清并测量体积，-20℃冻存，用于酸性磷酸酯酶的检测。
二、标准品准备：
取适量的试剂A苯酚(10mM)和蒸馏水，按下表稀释成0、0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM、0.5mM。
三、ACP加样
按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
如果样品中的酸性磷酸酯酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置2平行管，求平均值。
分光光度计测定510nm吸光度。
以空白孔调零，读取标准孔和各待测孔的吸光度。
酶标仪检测时上表中试剂等比例调整即可。
一般应在数小时检测完毕。
四、计算
ACP活性单位的定义：
在该实验条件下，每分钟每ml酶液产生1nmol酚(nmol/ml•min)为一个活性单位。
标准曲线绘制：
以各标准管吸光度值为纵坐标，相应的酚含量为横坐标绘制酚含量-吸光度值曲线，即为标准曲线。
计算：
根据测得的各待测样品的吸光度，于标准曲线上查出相应的酚含量，乘以稀释倍数后，换算为”nmol/ml•min”的活性单位。
1、 血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存，用于酸性磷酸酯酶的检测。
2、 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要可用PBS或生理盐水进行适当匀浆（一般细胞数量在106以上，组织应在100mg以上），低速3000-4000g离心取上清，-20℃冻存，用于酸性磷酸酯酶的检测。
3、 高活性样品：如果样品中含有较高活性的酸性磷酸酶，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，也可以采用试剂C：ACP 检测液稀释。
4、 植物样本：取适量的植物组织加入少量生理盐水或PBS，充分捣碎或研磨，静置30min，用纱布或滤纸过滤，4000g离心20min，取上清并测量体积，-20℃冻存，用于酸性磷酸酯酶的检测。
二、标准品准备：
取适量的试剂A苯酚(10mM)和蒸馏水，按下表稀释成0、0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM、0.5mM。
三、ACP加样
按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
如果样品中的酸性磷酸酯酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置2平行管，求平均值。
分光光度计测定510nm吸光度。
以空白孔调零，读取标准孔和各待测孔的吸光度。
酶标仪检测时上表中试剂等比例调整即可。
一般应在数小时检测完毕。
四、计算
ACP活性单位的定义：
在该实验条件下，每分钟每ml酶液产生1nmol酚(nmol/ml•min)为一个活性单位。
标准曲线绘制：
以各标准管吸光度值为纵坐标，相应的酚含量为横坐标绘制酚含量-吸光度值曲线，即为标准曲线。
计算：
根据测得的各待测样品的吸光度，于标准曲线上查出相应的酚含量，乘以稀释倍数后，换算为”nmol/ml•min”的活性单位。
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