

产品概述
product description
贝博®BBoxiProbe酵母活性氮(RNS)检测试剂盒是一种利用荧光探针进行活性氨检测的试剂盒。 探针可白由透过酵母细胞膜进入细胞内,并被酵母细胞内的 RNS 氧化,产生绿色荧光物质,并稳定存在于酵母胞内。绿色荧光强度与细胞内活性氮水平成正比,根据酵母细胞中绿色荧光的产生和强弱,可以判断酵母细胞 RNS 含量的变化情况。
保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1. 探针短期内经常使用可以 2-8℃℃保存。
2. 长期不用-20℃℃保存。免反复冻融。可以根据需要分装后冻存。
3. 染色液 A 为 DMSO 溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需
4. 要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
5. 可以用手捂住使其融解或 37℃℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固
6. 在吸头内壁产生损耗。
7. 试剂拆封后请尽快使用完!
2. 长期不用-20℃℃保存。免反复冻融。可以根据需要分装后冻存。
3. 染色液 A 为 DMSO 溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需
4. 要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
5. 可以用手捂住使其融解或 37℃℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固
6. 在吸头内壁产生损耗。
7. 试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
6个月
检测方法
荧光分光光度计/荧光酶标仪/流式细胞仪
适用样本
酵母
产品特点
1. 使用方便:可用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测;
2. 背景低,灵敏度高;
3. 线性范围宽,使用方便
2. 背景低,灵敏度高;
3. 线性范围宽,使用方便
仪器准备
1.荧光分光光度计/荧光酶标仪/流式细胞仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS或HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光专用黑色96孔板
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光专用黑色96孔板
使用注意事项
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体酒落。
2. 荧光探针标记后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
3. 探针标记完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的标记情况是否正常。
4. 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差,
5. 探针在光照和空气中易被氧化,注意避光密封保存。
6. 对不同的酵母样本,应选择合适的孵育时间和浓度,以观察 RNS 的变化。应根据预实验情况调整染色浓度和时间。
2. 荧光探针标记后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
3. 探针标记完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的标记情况是否正常。
4. 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差,
5. 探针在光照和空气中易被氧化,注意避光密封保存。
6. 对不同的酵母样本,应选择合适的孵育时间和浓度,以观察 RNS 的变化。应根据预实验情况调整染色浓度和时间。
使用方法
探针工作液配制:
1.根据样本数量,用纯水将探针稀释液 B进行 10倍稀释。
2.根据样本数量,用 10 倍稀释过的探针稀释液 B将探针进行稀释。即配成染
色工作液。(最佳染色浓度 需要预实验优化)
探针标记:
1.准备新鲜待测酵母样本。
2.用 PBS 洗涤菌体 2-3 次。离心收集菌体沉淀。
3.用染色工作液重悬菌体。
4.在 37°℃避光孵育 30 分钟。
5.孵育结束后,离心收集菌体。
6.用 PBS 清洗细胞一次。离心收集菌体。
7.用PBS 重悬菌体。充分混匀。
8.取200 ul加入荧光检测用 96 孔板。
9.置于酶标仪中,后于激发波长为 488 nm、发射波长 526 nm 检测荧光强度
结果处理:
荧光强度强表示酵母活性氮强度高。
1.根据样本数量,用纯水将探针稀释液 B进行 10倍稀释。
2.根据样本数量,用 10 倍稀释过的探针稀释液 B将探针进行稀释。即配成染
色工作液。(最佳染色浓度 需要预实验优化)
探针标记:
1.准备新鲜待测酵母样本。
2.用 PBS 洗涤菌体 2-3 次。离心收集菌体沉淀。
3.用染色工作液重悬菌体。
4.在 37°℃避光孵育 30 分钟。
5.孵育结束后,离心收集菌体。
6.用 PBS 清洗细胞一次。离心收集菌体。
7.用PBS 重悬菌体。充分混匀。
8.取200 ul加入荧光检测用 96 孔板。
9.置于酶标仪中,后于激发波长为 488 nm、发射波长 526 nm 检测荧光强度
结果处理:
荧光强度强表示酵母活性氮强度高。
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