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产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® 钙盐染色试剂盒采用Von Kossa硝酸银法，该试剂盒采用金属置换法，硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时，钙被银所置换，银盐在光的作用下被还原为黑色金属银。该法适用于大量样本的钙盐组织染色。 钙在人体内大量存在，构成骨骼作为支持人体的支架，在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。许多染料可以于钙形成螯合物。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
保存温度
室温避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
显微镜
适用样本
1. 切片
仪器准备
1. 显微镜
2. 移液器
3. 冰箱
4. 冰盒
2. 移液器
3. 冰箱
4. 冰盒
试剂准备
1. 10%中性福尔马林固定液、70%乙醇和95%乙醇。
2. 如需脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。
3. 如样品是石蜡切片，需自备90%乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
2. 如需脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。
3. 如样品是石蜡切片，需自备90%乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
耗材准备
1. 滴管
2. 吸头
3. 一次性手套
2. 吸头
3. 一次性手套
使用注意事项
1. 第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
2. 染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
3. 组织样品固定以中性福尔马林为佳，不宜采用酸性固定液，10%福尔马林固定4-6小时进行脱水包埋。
4. 该染色法可区分尿酸盐和钙盐，钙盐不溶于碳酸锂溶液，尿酸盐溶液溶于碳酸锂溶液，样品经碳酸锂处理后，入硝酸银溶液并经强光，尿酸盐呈阴性反应。
2. 染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
3. 组织样品固定以中性福尔马林为佳，不宜采用酸性固定液，10%福尔马林固定4-6小时进行脱水包埋。
4. 该染色法可区分尿酸盐和钙盐，钙盐不溶于碳酸锂溶液，尿酸盐溶液溶于碳酸锂溶液，样品经碳酸锂处理后，入硝酸银溶液并经强光，尿酸盐呈阴性反应。
使用方法
切片样本：
1. 组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。
2. 切片厚度5μm，常规脱蜡至水。
3. 蒸馏水洗1min。
4. 切片入Von Kossa硝酸银溶液强光照射20-60分钟。
5. 蒸馏水洗1分钟。
6. 入海波溶液处理2分钟。
7. 中性红、HE染色液或Van Gieson复染细胞核。
8. 常规脱水透明，中性树胶封固。
细胞样本：
1. 细胞固定
2. 用PBS洗涤2次
3. 浸入试剂A中，日光曝晒或紫外灯照射20-60分钟。
4. 蒸馏水洗1分钟。
5. 浸入试剂B浸泡2分钟。
6. 蒸馏水洗1分钟。
7. 中性红、HE染色液或Van Gieson复染细胞核。
8. 常规脱水透明，中性树胶封固。
染色结果：
钙盐 黑褐色至深黑色
细胞核 根据复染液不同而不同
背景 红色
阴性对照：
一般不需要做。
如有必要，取另一张切片或细胞样本，脱蜡至水或固定并洗涤后，浸入试剂C对照液中处理20分钟，流水冲洗5分钟。然后与样品片一起入试剂A处理，余下步骤相同，结果为阴性。
1. 组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。
2. 切片厚度5μm，常规脱蜡至水。
3. 蒸馏水洗1min。
4. 切片入Von Kossa硝酸银溶液强光照射20-60分钟。
5. 蒸馏水洗1分钟。
6. 入海波溶液处理2分钟。
7. 中性红、HE染色液或Van Gieson复染细胞核。
8. 常规脱水透明，中性树胶封固。
细胞样本：
1. 细胞固定
2. 用PBS洗涤2次
3. 浸入试剂A中，日光曝晒或紫外灯照射20-60分钟。
4. 蒸馏水洗1分钟。
5. 浸入试剂B浸泡2分钟。
6. 蒸馏水洗1分钟。
7. 中性红、HE染色液或Van Gieson复染细胞核。
8. 常规脱水透明，中性树胶封固。
染色结果：
钙盐 黑褐色至深黑色
细胞核 根据复染液不同而不同
背景 红色
阴性对照：
一般不需要做。
如有必要，取另一张切片或细胞样本，脱蜡至水或固定并洗涤后，浸入试剂C对照液中处理20分钟，流水冲洗5分钟。然后与样品片一起入试剂A处理，余下步骤相同，结果为阴性。
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