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保存温度
2-8℃避光
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期
6个月
检测方法
显微镜
适用样本
冰冻切片
仪器准备
恒温箱或水浴锅
试剂准备
1.蒸馏水
2.梯度乙醇
3.中性树胶
4.二甲苯
2.梯度乙醇
3.中性树胶
4.二甲苯
耗材准备
染缸
使用注意事项
1.三磷酸腺苷酶经固定后活性大受影响，因此切片不经固定。
2.ATPase 孵育液经混合后 pH 接近9.4，此时比较适宜酶的染色，如有条件，应测定并调整pH 合格后再使用。如果 pH 偏离很大或出现沉淀都可能导致染色失败，应现配现用。
3.ATPase 硫化液有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。每次用过后应拧紧盖子，否则容易挥发失效。配制硫化工作液时应在通风橱内操作。
4.ATPase 硫化工作液配后不久自行分解而失效，应每次小量配制。
5.冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
6.染色效果与酸性孵育液、碱性孵育液、ATPase 孵育液的 pH 变化有很大关系，尽量减少改变 pH 的因素，如避免反复开盖、避免室温放置过久等。
2.ATPase 孵育液经混合后 pH 接近9.4，此时比较适宜酶的染色，如有条件，应测定并调整pH 合格后再使用。如果 pH 偏离很大或出现沉淀都可能导致染色失败，应现配现用。
3.ATPase 硫化液有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。每次用过后应拧紧盖子，否则容易挥发失效。配制硫化工作液时应在通风橱内操作。
4.ATPase 硫化工作液配后不久自行分解而失效，应每次小量配制。
5.冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
6.染色效果与酸性孵育液、碱性孵育液、ATPase 孵育液的 pH 变化有很大关系，尽量减少改变 pH 的因素，如避免反复开盖、避免室温放置过久等。
使用方法
试剂的前处理：
1、ATPase 孵育液的配制：
ATPase 孵育液C1 和 ATPase 孵育液C2等比例混合即可，pH 应为9.3~9.5，现配现用。
2、ATPase 硫化工作液的配制:
ATPase 硫化溶液用蒸馏水稀释50~100 倍即可，现配现用。
3、酸性孵育液、碱性孵育液和 ATPase 孵育液使用前应提前 37℃孵育 10min。
操作步骤：
1、取新鲜组织，低温恒冷冰冻切片(用液氮快速冷冻效果更佳)，厚度 6um，连续切片贴
于玻片上，分别命名为 A 片、B 片，切片不需要固定。
2、A 片浸入预热好的酸性孵育液，37℃孵育 5min，水冲洗5s，再浸入预热好的碱性孵育液37℃孵育 30s，水冲洗5s。
4、取B片浸入碱性孵育液，37℃孵育15min，水冲洗 5s。
5、将A 片和 B 片浸入预热好的ATPase 孵育液，37℃孵育 30~60min，水冲洗 5s.
6、入 ATPase 钴溶液孵育3min，水冲洗 5s。
7、切片入硫化工作液，孵育30~60s，水冲洗 30s。
8、常规脱水透明，中性树胶封固。
染色结果:
ATPase 主要呈黑色或棕黑色
1、ATPase 孵育液的配制：
ATPase 孵育液C1 和 ATPase 孵育液C2等比例混合即可，pH 应为9.3~9.5，现配现用。
2、ATPase 硫化工作液的配制:
ATPase 硫化溶液用蒸馏水稀释50~100 倍即可，现配现用。
3、酸性孵育液、碱性孵育液和 ATPase 孵育液使用前应提前 37℃孵育 10min。
操作步骤：
1、取新鲜组织，低温恒冷冰冻切片(用液氮快速冷冻效果更佳)，厚度 6um，连续切片贴
于玻片上，分别命名为 A 片、B 片，切片不需要固定。
2、A 片浸入预热好的酸性孵育液，37℃孵育 5min，水冲洗5s，再浸入预热好的碱性孵育液37℃孵育 30s，水冲洗5s。
4、取B片浸入碱性孵育液，37℃孵育15min，水冲洗 5s。
5、将A 片和 B 片浸入预热好的ATPase 孵育液，37℃孵育 30~60min，水冲洗 5s.
6、入 ATPase 钴溶液孵育3min，水冲洗 5s。
7、切片入硫化工作液，孵育30~60s，水冲洗 30s。
8、常规脱水透明，中性树胶封固。
染色结果:
ATPase 主要呈黑色或棕黑色
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