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产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® T01细胞纺锤丝染色试剂盒是利用BBcellProbe® T系列荧光探针进行细胞纺锤丝特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的BBcellProbe® T01纺锤丝染色探针为绿色荧光标记的纺锤丝探针，具有492 / 523 nm的最大激发/发射波长。
BBcellProbe® T系列探针是对动物活细胞的纺锤丝进行选择性染色的一类荧光染料，该系列探针可以选择性标记纺锤丝蛋白质。当绿色荧光探针T01进入细胞后，其透膜基团被细胞内酯酶切除，释放出纺锤丝探针，探针在整个纺锤丝上扩散，最佳浓度时可以使整个纺锤丝染色。染色液T01在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与纺锤丝结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出绿色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。
BBcellProbe® T系列纺锤丝探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针，贝博还可以提供红色、橙色、深红色等颜色的染色试剂盒。
以96孔板每孔100 μl染色液计，本试剂盒小包装可以染色100个样本。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
保存温度
-20℃ 避光保存。
注意事项
1. 避免反复冻融。
2. 染色液A、促溶剂B在冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4. 试剂拆封后请尽快使用完！
2. 染色液A、促溶剂B在冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4. 试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
1.高内涵成像系统
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜
适用样本
1. 悬浮细胞
2. 贴壁细胞
2. 贴壁细胞
产品应用
1.高内涵成像系统
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜
仪器准备
1.激光共聚焦/荧光显微镜
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液 或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2. T01染色液、促溶剂在冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。3. 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5. 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
6. 染色后立即进行分析。
7. 染色液有细胞毒性，可以抑制细胞的有丝分裂。
2. T01染色液、促溶剂在冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。3. 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5. 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
6. 染色后立即进行分析。
7. 染色液有细胞毒性，可以抑制细胞的有丝分裂。
使用方法
1． 染色工作液的配制：根据样本数量，将37℃培养箱预热的BBcellProbe® T01荧光染料A和促溶剂试剂B等比例混合均匀（例如：10 μl A加入10 μl B，充分混合均匀），配制成500X染色液。再用HBSS或其他缓冲液将以上混合过促溶剂的500X染色液进行500倍稀释，配制成染色工作液。
2． 细胞染色
悬浮细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 加入适量体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL以上。
3) 在37 ℃孵育细胞 30-120分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用30分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 孵育结束，500×g离心5分钟。
5) 移除上清液，再次缓慢加入HBSS重悬细胞，洗涤细胞。
6) 重复（4），（5）步骤一次。
贴壁细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3) 37 ℃孵育细胞30-120分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用30分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 吸干染色工作液，用HBSS洗培养板或盖玻片2次，每次用HBSS覆盖所有细胞，然后吸干HBSS。
3． 用激光共聚焦显微镜检测激发波长为488 nm，最大发射波长为523 nm。
2． 细胞染色
悬浮细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 加入适量体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL以上。
3) 在37 ℃孵育细胞 30-120分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用30分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 孵育结束，500×g离心5分钟。
5) 移除上清液，再次缓慢加入HBSS重悬细胞，洗涤细胞。
6) 重复（4），（5）步骤一次。
贴壁细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3) 37 ℃孵育细胞30-120分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用30分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 吸干染色工作液，用HBSS洗培养板或盖玻片2次，每次用HBSS覆盖所有细胞，然后吸干HBSS。
3． 用激光共聚焦显微镜检测激发波长为488 nm，最大发射波长为523 nm。
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