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产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® 死细胞核染色试剂盒是利用BBcellProbe® N系列探针进行细胞核特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的BBcellProbe® N11死细胞核染色探针为绿色荧光标记的死细胞核探针，具有500 / 525 nm的最大激发/发射波长。
BBcellProbe® N11死细胞核染色探针室一种不能透过活细胞完整质膜的试剂，进入膜损伤细胞（死细胞）后，探针与dsDNA结合产生荧光。染色探针N11在进与DNA结合之前荧光较弱，当与DNA结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出绿色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。
BBcellProbe® N系列探针是对细胞的细胞核进行特异性染色的一类荧光染料，该系列探针有2类，分别可以选择性标记活细胞和死细胞核。BBcellProbe® N0系列可以标记活细胞，BBcellProbe® N1系列可以标记死细胞。
以96孔板每孔100 ul染色液计，本试剂盒小包装可以染色500个样本。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
保存温度
-20℃ 避光保存。
注意事项
1.染料短期2周内可以2-8℃保存。染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完！
2.染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
1.激光共聚焦
2.荧光显微镜
3.流式细胞仪
2.荧光显微镜
3.流式细胞仪
适用样本
1. 悬浮细胞
2. 贴壁细胞
2. 贴壁细胞
产品应用
1.激光共聚焦
2.荧光显微镜
3.流式细胞仪
2.荧光显微镜
3.流式细胞仪
仪器准备
1.激光共聚焦/荧光显微镜
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液 或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
3. N11染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4. 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
5. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
6. 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
7.染色后立即进行分析。
8. 本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
3. N11染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4. 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
5. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
6. 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
7.染色后立即进行分析。
8. 本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
使用方法
一、染色工作液的配制：
1、根据样本数量，用37℃培养箱预热染料稀释液试剂B将BBcellProbeTM N11荧光染料10倍稀释。再用HBSS等缓冲液或相应的无血清培养基将探针N11进行50-100倍稀释，配制成染色工作液。
二、细胞染色
A：悬浮细胞染色
1. 用PBS洗涤细胞2次。
2. 加入适量体积的染色工作液重悬细胞，使其密度大约为1×106/mL。
3. 在37 ℃避光孵育细胞 15～60分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用15分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
B：贴壁细胞原位染色
1. 用PBS洗涤细胞2次。
2. 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3. 37 ℃孵育细胞 15～60分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用15分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4. 吸干染色工作液，用培养液洗培养板或盖玻片2～3次，然后加入培养基。
三、用荧光显微镜或流式细胞仪检测激发波长为488 nm，最大发射波长为525 nm。
1、根据样本数量，用37℃培养箱预热染料稀释液试剂B将BBcellProbeTM N11荧光染料10倍稀释。再用HBSS等缓冲液或相应的无血清培养基将探针N11进行50-100倍稀释，配制成染色工作液。
二、细胞染色
A：悬浮细胞染色
1. 用PBS洗涤细胞2次。
2. 加入适量体积的染色工作液重悬细胞，使其密度大约为1×106/mL。
3. 在37 ℃避光孵育细胞 15～60分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用15分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
B：贴壁细胞原位染色
1. 用PBS洗涤细胞2次。
2. 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3. 37 ℃孵育细胞 15～60分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用15分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4. 吸干染色工作液，用培养液洗培养板或盖玻片2～3次，然后加入培养基。
三、用荧光显微镜或流式细胞仪检测激发波长为488 nm，最大发射波长为525 nm。
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