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产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 蛋白脱脂肪离心柱可以通过简单的离心步骤快速去除液体蛋白样本中的脂肪污染。 贝博® BBproExtra® 蛋白脱脂肪离心柱使用蛋白质低吸附性的BBproExtra® 过滤膜制造，具有快速、方便、回收率高的特点。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 贝博® BBproExtra® 还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
保存温度
室温
注意事项
1.用过的脱脂柱要保持脱脂过滤膜湿润，不能干掉。
2.拆封后请尽快使用完！
2.拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
产品特点
1.高回收率 >95%；
2.热密封膜将下游溶出物污染可能性降到最低；
3.100% 完整性检测确保性能可靠；
4.透明外壳和体积刻度方便样品察看；
5.直接吸取样品减少处理步骤；
6.没有RNase / DNase污染。
7.最大相对离心力为16,000xg
2.热密封膜将下游溶出物污染可能性降到最低；
3.100% 完整性检测确保性能可靠；
4.透明外壳和体积刻度方便样品察看；
5.直接吸取样品减少处理步骤；
6.没有RNase / DNase污染。
7.最大相对离心力为16,000xg
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.振荡器
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.纯水
2.纯水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.由于脱脂膜是疏水性的，为了确保滤膜具有合适的润湿性，在制造过程中添加了少量无毒润湿剂。如果认为有必要，可以在使用前将少量温热的纯水流过过滤膜，即可去除润湿剂。
2.如果需要多次重复使用，离心速度不要太高；
3.重复使用时要仔细检查管壁上有没有裂纹；
4.样品里的杂质如果可能尽量在脱脂离心前去除。
5.不同的蛋白脱脂的速度不同，有的需要长时间离心，有的则很快就好。和蛋白样品纯度，所用buffer类型，蛋白的浓度有关系。离心时要先短些时间，观察一下脱脂速度；
6.脱脂柱处理蛋白会有蛋白损失，样品体积大就分批离心，尽可能不要离心时间太长。
7.脱脂液的样本回收率低是由于吸附损失而造成的。
8.吸附损失取决于溶质浓度、疏水性、与过滤脱脂管表面接触的温度和时间、样本成分及pH。为了最大限度降低损失，离心后请立即回收脱脂后的样本。
9.加蛋白液或Buffer到脱脂管时，可以用蓝吸头，用吸头伸入脱脂管中时，必须防止碰到滤膜，以免戳破滤膜。
2.如果需要多次重复使用，离心速度不要太高；
3.重复使用时要仔细检查管壁上有没有裂纹；
4.样品里的杂质如果可能尽量在脱脂离心前去除。
5.不同的蛋白脱脂的速度不同，有的需要长时间离心，有的则很快就好。和蛋白样品纯度，所用buffer类型，蛋白的浓度有关系。离心时要先短些时间，观察一下脱脂速度；
6.脱脂柱处理蛋白会有蛋白损失，样品体积大就分批离心，尽可能不要离心时间太长。
7.脱脂液的样本回收率低是由于吸附损失而造成的。
8.吸附损失取决于溶质浓度、疏水性、与过滤脱脂管表面接触的温度和时间、样本成分及pH。为了最大限度降低损失，离心后请立即回收脱脂后的样本。
9.加蛋白液或Buffer到脱脂管时，可以用蓝吸头，用吸头伸入脱脂管中时，必须防止碰到滤膜，以免戳破滤膜。
使用方法
产品规格参数：
样本的最大体积：500ul
建议的相对离心力：10,000 x g
最大的相对离心力： 16,000 x g
有效膜面积：1 cm2
截留体积：< 5ul
尺寸：
过滤管 0.5ml
外套管 2ml
过滤管材料：
过滤管：苯乙烯共聚物/丁二烯
收集管：聚丙烯
脱脂柱预处理：
1. 用缓冲液或纯水进行预清洗。
2. 离心管中的过滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。
操作步骤：
1. 将待脱脂蛋白液体样品在12000 x g离心约15分钟。取上清。
2. 打开离心管盖子，将内管插入所提供的一个微量离心管中，垂直握住设备，使过滤管开口朝上。
3. 向内过滤管中加入不超过500 ul的待处理样品，并盖上盖子。
4. 将盖好盖子的脱脂管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中央；用一个类似的离心管平衡。
5. 室温下以10000-12000 x g离心约1-6分钟。
6. 离心结束后将整个过滤管从离心机中取出，取出内管。
7. 回收收集管中的脱脂后样品。
样本的最大体积：500ul
建议的相对离心力：10,000 x g
最大的相对离心力： 16,000 x g
有效膜面积：1 cm2
截留体积：< 5ul
尺寸：
过滤管 0.5ml
外套管 2ml
过滤管材料：
过滤管：苯乙烯共聚物/丁二烯
收集管：聚丙烯
脱脂柱预处理：
1. 用缓冲液或纯水进行预清洗。
2. 离心管中的过滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。
操作步骤：
1. 将待脱脂蛋白液体样品在12000 x g离心约15分钟。取上清。
2. 打开离心管盖子，将内管插入所提供的一个微量离心管中，垂直握住设备，使过滤管开口朝上。
3. 向内过滤管中加入不超过500 ul的待处理样品，并盖上盖子。
4. 将盖好盖子的脱脂管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中央；用一个类似的离心管平衡。
5. 室温下以10000-12000 x g离心约1-6分钟。
6. 离心结束后将整个过滤管从离心机中取出，取出内管。
7. 回收收集管中的脱脂后样品。
常见问题分析
1.蛋白脱脂柱会损失蛋白吗？
滤膜不会吸附蛋白质，蛋白质损失很小。
2.可以重复使用脱脂柱么？
可以重复使用。如果使用、清洗、保存得当，可以反复使用多次。但是多次重复使用后过滤膜有破损风险，注意使用过程中尽量避免尖锐物品戳到膜。离心力不要过大。
3.有时候用蛋白脱脂离心管连水都离不下来，可能是什么原因？
如果出现这种情况，可能时过滤膜的孔被堵住。请先用0.1M NaOH清洗再离心。最后用缓冲液或纯水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用，如暂时不用，请保持润湿状态，避免重新干燥。
4.说明书中推荐在室温下进行离心，考虑到蛋白的稳定性，是否可以在4℃进行离心？
可以，但是低温会增加蛋白样品的粘性，导致流速减慢，建议可将离心时间延长。
滤膜不会吸附蛋白质，蛋白质损失很小。
2.可以重复使用脱脂柱么？
可以重复使用。如果使用、清洗、保存得当，可以反复使用多次。但是多次重复使用后过滤膜有破损风险，注意使用过程中尽量避免尖锐物品戳到膜。离心力不要过大。
3.有时候用蛋白脱脂离心管连水都离不下来，可能是什么原因？
如果出现这种情况，可能时过滤膜的孔被堵住。请先用0.1M NaOH清洗再离心。最后用缓冲液或纯水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用，如暂时不用，请保持润湿状态，避免重新干燥。
4.说明书中推荐在室温下进行离心，考虑到蛋白的稳定性，是否可以在4℃进行离心？
可以，但是低温会增加蛋白样品的粘性，导致流速减慢，建议可将离心时间延长。
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