bestbio@163.com
服务热线：021-33921235
登录
说明书下载
产品概述
product description
高尔基体（Golgi apparatus, Golgi bodies）是由许多扁平的囊泡构成的以分泌为主要功能的细胞器。又称高尔基器或高尔基复合体；高尔基体是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间，呈弓形或半球形，凸出的一面对着内质网称为形成面（forming face）或顺面（cis face）。凹进的一面对着质膜称为成熟面（mature face）或反面（trans face）。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡，在具有极性的细胞中，高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中。因其看上极像滑面内质网，因此有科学家认为它是由滑面内质网进化而来的。 高尔基体的主要功能将内质网合成的蛋白质进行加工、对比分类、与包装，然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。 贝博® BBproExtra® 酵母高尔基体提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种酵母样品中提取高尔基体。提取过程简单方便。 本试剂盒不能用于冷冻酵母样品的高尔基体提取。 本试剂盒提取的为完整的高尔基体，可以用于下游的高尔基体功能研究，或者用于蛋白裂解提取高尔基体蛋白。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.提取液Ｂ长期不用时-20℃保存。
2.酵母洗涤液D长期不用时-20℃保存。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
2.酵母洗涤液D长期不用时-20℃保存。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
酵母
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 酵母培养物，在4℃，1000×g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
2. 用PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每100ul体积或100mg湿重酵母沉淀物中加入400ul酵母高尔基体提取液A，混匀后，在30℃条件下保温15分钟。
4. 在1000×g条件下离心5-10分钟，收集酵母沉淀。
5. 用300ul酵母洗涤液D洗涤酵母两次，离心收集酵母。
6. 酵母沉淀物中加入500ul酵母高尔基体提取液B，充分混匀后。
7. 在37℃或室温条件下轻微振荡60-90分钟。
8. 在2000×g条件下离心5-10分钟，弃上清，收集沉淀。
9. 沉淀用PBS洗涤两次。2000×g离心收集沉淀。
10. 在沉淀中加入400μl酵母高尔基体提取液 C，充分混匀，然后在振荡器上振荡10-30分钟。
11. 在4℃，500×g条件下离心5分钟，弃沉淀，收集上清。
12. 将上清在4℃，3000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
13. 将上清在4℃，5000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
14. 将上清在4℃，20000×g条件下离心20分钟。弃上清，留沉淀。
15. 在沉淀中加入400μl高尔基体保存液E，混匀。
16. 在4℃，20000×g条件下离心30分钟。弃上清，收集沉淀。即得到酵母高尔基体样品。
17. 根据下游实验需要，将沉淀用相应的缓冲溶液重悬。置冰箱备用或直接用于下游实验。
2. 用PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每100ul体积或100mg湿重酵母沉淀物中加入400ul酵母高尔基体提取液A，混匀后，在30℃条件下保温15分钟。
4. 在1000×g条件下离心5-10分钟，收集酵母沉淀。
5. 用300ul酵母洗涤液D洗涤酵母两次，离心收集酵母。
6. 酵母沉淀物中加入500ul酵母高尔基体提取液B，充分混匀后。
7. 在37℃或室温条件下轻微振荡60-90分钟。
8. 在2000×g条件下离心5-10分钟，弃上清，收集沉淀。
9. 沉淀用PBS洗涤两次。2000×g离心收集沉淀。
10. 在沉淀中加入400μl酵母高尔基体提取液 C，充分混匀，然后在振荡器上振荡10-30分钟。
11. 在4℃，500×g条件下离心5分钟，弃沉淀，收集上清。
12. 将上清在4℃，3000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
13. 将上清在4℃，5000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
14. 将上清在4℃，20000×g条件下离心20分钟。弃上清，留沉淀。
15. 在沉淀中加入400μl高尔基体保存液E，混匀。
16. 在4℃，20000×g条件下离心30分钟。弃上清，收集沉淀。即得到酵母高尔基体样品。
17. 根据下游实验需要，将沉淀用相应的缓冲溶液重悬。置冰箱备用或直接用于下游实验。
大包装和定制包装服务
-
优惠促销Promotion
-
轻松下单Order
-
在线留言Online message
-
帮助中心Help center