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产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 酵母核提取试剂盒适用于从各种酵母中提取完整的具有活性的细胞核。提取过程简单方便。制备的酵母核纯度高，保持天然活性，绝少交叉污染。 提取的细胞核可以用于核功能研究或者蛋白提取等下游应用。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白提取液AC 2-8℃保存；
2.保存液D 2-8℃保存；
3.蛋白提取液B -20℃保存。
2.保存液D 2-8℃保存；
3.蛋白提取液B -20℃保存。
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
酵母
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5.离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM，r/min）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：
g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5.离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM，r/min）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：
g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。
使用方法
1. 酵母培养物，在4℃，1000×g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
2. 用PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每100μl体积酵母沉淀物中加入200μl酵母核蛋白提取液A，混匀后，在30℃条件下保温15分钟。
4. 在1000×g条件下离心5-10分钟，弃上清，收集酵母沉淀。
5. 用500μl PBS洗涤酵母一次，离心收集菌体。
6. 酵母沉淀物中加入300-500μl酵母蛋白提取液B，充分混匀。
7. 在37℃或室温条件下轻微振荡45-60分钟。
8. 在1000×g条件下离心5-10分钟，收集沉淀，弃上清。
9. 用500μl PBS洗涤沉淀。离心收集沉淀。
10. 沉淀中加入500μl酵母核提取液 C，高速涡旋15秒混匀，然后在振荡器上振荡15-30分钟。
11. 再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，1000×g条件下离心10分钟，弃上清，沉淀即为酵母细胞核。
12. 用适量试剂D重悬酵母核，置4℃保存备用或直接用于下游实验。
2. 用PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每100μl体积酵母沉淀物中加入200μl酵母核蛋白提取液A，混匀后，在30℃条件下保温15分钟。
4. 在1000×g条件下离心5-10分钟，弃上清，收集酵母沉淀。
5. 用500μl PBS洗涤酵母一次，离心收集菌体。
6. 酵母沉淀物中加入300-500μl酵母蛋白提取液B，充分混匀。
7. 在37℃或室温条件下轻微振荡45-60分钟。
8. 在1000×g条件下离心5-10分钟，收集沉淀，弃上清。
9. 用500μl PBS洗涤沉淀。离心收集沉淀。
10. 沉淀中加入500μl酵母核提取液 C，高速涡旋15秒混匀，然后在振荡器上振荡15-30分钟。
11. 再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，1000×g条件下离心10分钟，弃上清，沉淀即为酵母细胞核。
12. 用适量试剂D重悬酵母核，置4℃保存备用或直接用于下游实验。
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