真菌原生质体制备试剂盒

BB-36211
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产品概述 product description

贝博® BBproExtra® 真菌原生质体制备试剂盒提供全套试剂，适用于从各种真菌样本制备原生质体。此试剂盒提供了一个系统，维持原生质体是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离原生质体，而绝少交叉污染。
本试剂盒适用于黑曲霉、青霉、木霉、米曲霉等各种丝状真菌和各种蕈类真菌样本原生质体的制备。本试剂不适合用于酵母样本的原生质体的制备，需要酵母样本的原生质体制备，请选用贝博其他货号的试剂盒（相关产品：BB-36215）。

保存温度
2-8℃
注意事项
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
有效期
一年
适用样本
真菌
仪器准备
1. 离心机
2. 振荡器
3. 涡旋混匀器
4. 移液器
5. 冰箱
6. 冰盒
试剂准备
PBS缓冲液
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
使用注意事项
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 提取液制备：
每500 μl冷的试剂B中加入2 μl试剂C，混匀后备用。
2. 取50-100 mg真菌样本， 用PBS洗一次
3. 在菌体沉淀中加入500 μl洗涤液A充分混匀。
4. 在室温条件下静置15分钟。
5. 在3000×g条件下离心10分钟，弃上清，收集菌体沉淀。
6. 在沉淀中加入500 μl制备液B，充分混匀。
7. 将提取液B样本悬液置振荡器上37℃振荡1-4小时。
8. 离心力2000×g离心5分钟，收集沉淀，即为原生质体。
9. 用PBS洗涤原生质体一次。
10. 在原生质体沉淀中加入500 μl试剂D重悬原生质体，混匀。
11. 将上述原生质体样本置2-8℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
参考文献
Yihan Qin et al.
Construction of Aspergillus Oryzae food-grade expression system based on auxotrophic markers
Food Biotechnology 2021
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