2-8℃

1. 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2. 蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3. 试剂拆封后请尽快使用完！

一年

组织

1. 离心机
2. 振荡器
3. 匀浆机/匀浆器
4. 涡旋混匀器
5. 移液器
6. 冰箱
7. 冰盒

1. PBS缓冲液
2. 蛋白定量试剂盒

1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套

1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1. 提取液准备：
每500 μl冷的提取液A加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物。混匀后置冰上备用。
2. 取50 mg-100 mg组织样本，用PBS洗干净，用手术剪刀尽可能剪碎，加入500 μl冷的试剂A，用组织匀浆机/匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 将匀浆液置2-8℃条件下振荡20-30分钟。
4. 在4℃，1200×g条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到胞质组分，请置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
6. 沉淀用PBS洗涤一次，在4℃，2000×g条件下离心15分钟，弃上清。
7. 沉淀为细胞核组分，将沉淀直接用于下游实验或用200 μl保存液B重悬后保存备用。

1. Yanning Li et al.
C-peptide prevents NF-κB from recruiting p300 and binding to the inos promoter in diabetic nephropathy
FASEB Journal 2018

2. Hong Yu et al.
Protective roles of isoastilbin against Alzheimer's disease via Nrf2‑mediated antioxidation and anti‑apoptosis
International Journal of Molecular Medicine 2019

3. Chuanshang Cheng et al.
Oregano Essential Oil Attenuates RAW264.7 Cells from Lipopolysaccharide-Induced Inflammatory Response through Regulating NADPH Oxidase Activation-Driven Oxidative Stress
Molecules 2018

4. Yi Zou et al.
Oregano Essential Oil Induces SOD1 and GSH Expression through Nrf2 Activation and Alleviates Hydrogen Peroxide-Induced Oxidative Damage in IPEC-J2 Cells
Oxidative Medicine and Cellular Longevity 2016