细菌外膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)

BB-31872
选择规格
  • 50T
  • 100T
价格
  • ¥800元
  • ¥1500元
数量
产品概述 product description

保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
2-D,WB,IEF等
适用样本
革兰氏阴性菌
产品特点
1.使用方便。
2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
5.本品不含 EDTA,可以用于金属螯合层析等下游应用。
产品应用
2-D,WB,IEF等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
使用方法
1.提取液准备:
每 500 μ 提取液 A 中加入2m 蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用
2.收集待提取菌体,用 PBS 洗菌体2次。
3.按每 50-150 mg 湿重菌体样本加入 500 μ 提取液 A(大约菌体和提取液体积比
1:2-1:5,完全淹没菌体即可),吹打混匀,在 2-8°℃振荡 30 分钟-1 小时。
4.将提取液在 2-8℃℃下,12000xg力离心5分钟,取上清。
5.将上清液在 37°C水浴 10 分钟。
6.在 37°℃ 500-1000xg力离心5分钟。
7.此时液体分为2层,小心移除上层溶液,留管底部下层大约 30-50ml 液体。
8.用 50-150ul 冷的膜蛋白溶解液溶解该溶液,即得细菌外膜蛋白样品。