细胞膜提取试剂盒

BB-31046
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产品概述 product description

贝博® BBproExtra® 细胞膜提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞中提取细胞质膜组份。提取过程简单方便，可在1小时内完成。 贝博® BBproExtra® 可以提供各种蛋白质提取、裂解、酶活测定、细胞器分离、免疫组织化学、蛋白表达、蛋白标记等蛋白质相关试剂盒产品。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
适用样本
细胞/组织
产品应用
WB等
仪器准备
1. 离心机
2. 振荡器
3. 涡旋混匀器
4. 移液器
5. 冰箱
6. 冰盒
试剂准备
PBS缓冲液
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
使用注意事项
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
使用方法
1. 提取液制备：
每1000 μl冷的提取液A、洗涤液D中都分别加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物和2 μl磷酸酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞，在4℃，800×g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 在细胞中加入500 -1000 μl冷的提取液A，充分混匀后，在4℃条件下静置30分钟，中途每隔10分钟用移液器轻轻吹打混匀。
5. 在4℃，1000×g条件下离心5-10分钟。将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。
6. 上清在4℃，20000×g条件下离心30分钟。弃上清，留沉淀。
7. 在沉淀中加入400 μl冷的洗涤液D，充分混匀。
8. 在4℃，20000×g条件下离心30分钟。弃上清，留沉淀。
9. 沉淀即为细胞膜。将细胞膜提取物直接用于下游实验或于-80℃冰箱保存备用。
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